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Extracción de ADN
Extracción
de ADN
PROTOCOLO CASERO PARA EXTRACCION DE ADN DE CEBOLLA
Objetivos
Comprender la importancia de aislar material genético de una célula como
lapremisa de la realización de estudios moleculares
Conocer los principios básicos de una metodológica de extracción de ADN casera
Introducción
El ADN es una molécula que se encuentra en todas las células de los seres
vivos, sean estos procariotas o eucariotas. Es una molécula larga que forma una
doble hélice, compuesta de subunidades llamadas nucleótidos y cada nucleótido
consta de tres partes: un grupo fosfato, una azúcar denominada desoxirribosa, y
una de cuatro posibles bases nitrogenadas, que son adenina (A), guanina (G),
timina (T) y citosina (C). El ADN es una molécula formada por dos hebras que se
encuentran unidas por enlaces débiles (puentes de hidrógeno) entre las bases
nitrogenadas.
Para entender la importancia del ADN, es necesario entender qué es un gen. Dentro de la
cadena de ADN existen regiones que codifican o crean proteínas y regiones que
no, las regiones que codifican para hacer proteínas se denominan genes. Dentro
de una cadena de ADN, la secuencia de bases nitrogenadas puede variar de un
individuo a otro, y es por esto que el código de ADN es único para cada
individuo. Para entender mejor esto se puede hacer una analogía con las letras y
el lenguaje; depende de la disposición de las letras para formar palabras y
dependiendo de la disposición de las letras formarán diferentes palabras que
tendrán diferentes significados. De manera similar, un
gen debe tener las bases correctas en secuencia adecuada. Así como “afecto” y
“efecto” tienen diferentes significados y “ofecto” no significa nada, las
distintas secuencias delas bases de ADN pueden codificar diferentes tipos de
información formando diferentes tipos de características como el color de los
ojos, tipo sanguíneo, el color de las flores, forma de alas, entre muchas otras
características.
Siendo el ADN una molécula tan importante y tan llena de información, surgen
diferentes usos en diversas áreas como la medicina para el diagnóstico de
enfermedades, la ecología para determinar la diversidad de una especie dentro
de una población, investigación forense para identificación de individuos de
interés en investigaciones criminales, biotecnología en técnicas como
ingeniería genética, etc.
Materiales
Cebolla fresca
Papaya
Mortero
Papel filtro de café
Pinza
Tubo de vidrio largo con boca ancha
Reactivos
Detergente/solución de sal:
20 ml detergente (para lavar ropa)
20 g NaCl
180 ml agua destilada
10 mL de jugo de papaya
(para que el jugo de papaya no esté con impurezas es importante cernirlo con un
papel filtro para café)
Solución salina al 5% (NaCl)
Metodología.-
Macerar una porción de cebolla en un mortero junto con 50 mL de
detergente/solución de sal
Filtrar la mezcla con un filtro para café y colocarla en un tubo de vidrio
largo
Colocar los 10 mL de jugo de papaya en el tubo de vidrio y mezclar suavemente
Colocar 20 mL de etanol al 70% a 10-12°C y dejarlo reposar de 1 a 5 minutos,
esto servirá para separar el ADN del resto de compuestos. Pronto
se podrá observar que el ADN empieza a flotar entre la capa de etanol y la
mezcla anterior.
Para poder recuperar elADN es necesario usar una pinza, para trasladarlo a un
tubo eppendorf en donde se le agregara 1000 uL de Solucion salina al 5% para
conservarlo.
La función de nutrición es fundamental para la supervivencia de los seres
vivos, ya que les permite crecer, desarrollarse, renovar los tejidos dañados o
viejos y disponer de la energía necesaria para el funcionamiento
del
organismo.
Hay dos tipos de nutrición: la autótrofa y la heterótrofa.
* Los seres vivos autótrofos, son aquellos capaces de fabricar la materia
orgánica que constituye su alimento, a partir de sustancias inorgánicas
sencillas (H2O, CO2 y sales minerales) y utilizando una fuente de energía. El
proceso autótrofo más común en los seres vivos es la fotosíntesis, que utiliza
como
fuente de energía la luminosa procedente del Sol y que es captada por un pigmento
denominado clorofila.
* Los seres vivos heterótrofos, son aquellos que no pueden fabricar la materia
orgánica que constituye su alimento y tienen que tomarla
del medio:
comiéndose a otros seres vivos, sus productos o sus restos.
Función de relación: estimulo/respuesta
Función de relación
Es la capacidad de los seres vivos de captar señales procedentes
del
medio (externo e interno) y de responder a ellas, es decir nos permite darnos
cuenta de lo que ocurre a nuestro alrededor y actuar en función de ello. La
función de relación también es muy importante para la supervivencia de los
seres vivos pues nos permite nutrirnos, reproducirnos y protegernos
del medio donde vivimos
(resguardarnos
del frío,
del calor, etc.) y de otros seres vivos.
Función de reproducción
Es la capacidad de los seresvivos de fabricar nuevos seres semejantes en su
anatomía y en su fisiología a sus progenitores. La función de
reproducción no es fundamental para la supervivencia de
un
ser vivo. Sin embargo la reproducción es fundamental para el mantenimiento de
la vida misma, ya que si los seres vivos no se reprodujeran las especies se
extinguirían y con
ellas, la vida. Al igual que en la
nutrición hay dos grandes tipos de reproducción: la reproducción asexual y la
reproducción sexual.
* La reproducción asexual se produce cuando no intervienen células
especializadas y no hay intercambio genético, por lo que los descendientes son
genéticamente idénticos a su progenitor.
* La reproducción sexual se produce cuando intervienen células especializadas
(gametos) de diferente sexo y ocurre una mezcla de la información genética
contenida en
ellas.
EL HOMBRE: FUNCIONES VITALES.
El hombre es
un animal vertebrado que pertenece al
grupo de los mamíferos.
El hombre
como
todos los seres vivos, nace, crece, nota los cambios que se producen a su
alrededor, se reproduce y muere.
Todos los actos que los seres vivos realizan para vivir se
llaman funciones vitales. Las funciones vitales pueden resumirse en
tres: función de nutrición, función de relación y función de reproducción.
FUNCIÓN DE NUTRICIÓN.-
El hombre se nutre tomando oxígeno
del aire por medio de los
pulmones, tomando alimentos y transformándolos en el aparato digestivo y
distribuyendo los alimentos por todo el cuerpo por medio de la sangre.
FUNCIÓN DE RELACIÓN.-
Elhombre se relaciona con los demás seres vivos por medio de los sentidos y
del
aparato locomotor.
Así percibe lo que pasa a su alrededor,
nota los cambios, se desplaza, etc.
FUNCIÓN DE REPRODUCCIÓN.-
El hombre se reproduce de forma vivípara, es decir, nace
del vientre de su
madre
como los
otros animales mamíferos.
ÓRGANOS Y APARATOS.-
El hombre realiza sus funciones vitales por medio de órganos y aparatos.
En el cuerpo humano hay muchos órganos.
Los ojos, los
pulmones, el corazón, el estómago, los músculos, etc., son órganos.
El conjunto de órganos que realizan la misma función forman
un
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