INTRODUCCIÓN

Objetivos

1) Realizar pruebas sencillas para identificar presencia de carbono y agua en muestras derivadas de organismos vivos.
2) Enumerar los diversos tipos de compuestos organicos presentes en los organismos vivos.
3) Identificar mediante pruebas sencillas presencia de carbohidratos, proteínas y lípidos en muestras derivadas de organismos vivos.
4) Distinguir resultados positivos y negativos en las pruebas realizadas.

Material

- Sudan III
- Reactivo Benedict
- Eter
- Tinta roja
- Aceite
- Almidón (yuquilla)
- Agua
- Papel de china blanco
- Papel aluminio
- Azúcar
- Maní
- Tocino
- Cebolla
- Manzanas
- Naranja
- Carne de res cruda
- Cuaderno de apunte
- Lapiz
- Crayones

Equipo:

- Vidrio de reloj
- Gotero

- Tubos de ensayo
- Beackers
- Mortero
- Estufa
- Espatula
- Gradilla
PROCEDIMIENTO

PARTE 1

A. presencia de carbono y agua en sustancias derivadas de organismos vivos.

1) Construya con papel aluminio 5 bandejas pequeñas como la que le mostrara su profesor.
2) Coloque en cada bandeja lo siguiente: bandeja #1, trocito de carne, bandeja #2, trocito de manzana, bandeja #3 azúcar, bandeja #4 almidón, y en la bandeja #5 trocito de tocino, luego coloque las bandejas sobre la estufa.
3) Caliente hasta que los materiales se tornen negros, observe y dibuje. Anote sus resultados.

Preguntas
Deben responderse en base a las observaciones.
¿Qué sucedió en cada bandeja?
Escriba sus conclusiones.

B. Identificación de Carbohidratos.

1) Marque 4 tubos de ensayo del #1 al #4.
2) Añada unas gotas de jugo de cebolla al tubo #1, (obtenga el jugo macerando unpequeño trozo de cebolla en el mortero). Agregue unas gotas de Reactivo Benedict y caliente en baño María. Observe y anote sus resultados. Dibuje.
3) Ponga jugo de naranja (unas gotas) en el tubo #2, agréguele unas gotas de reactivo de Benedict y caliente en baño de María. Observe y anote sus resultados. Dibuje.
4) En el tubo #3 ponga puré de manzana (lo que cabe en la punta de la espatula). Para obtener puré de manzana macee en el mortero. Agregue unas gotas de reactivo de Benedict y caliente en baño de María. Observe y anote sus resultados. Dibuje.
5) Ponga en el tubo #4, almidón (lo que agarre con la punta de la espatula), agregue agua, luego agregue unas gotas de reactivo de Benedict y caliente en baño de María. Observe, anote los resultados y dibuje.

Preguntas
Las siguientes preguntas deben responderse en base a las observaciones.

1) ¿Qué coloración tomó el tubo #1?
2) ¿Qué observo en el tubo #2?
3) ¿Qué ocurrió en el tubo #3?
4) ¿Qué sucedió en el tubo que contenía almidón?
5) Escriba sus conclusiones.

C. Solubilidad de los Carbohidratos.

a) En un tubo de ensayo ponga azúcar (o lo que agarre con la punta de una espatula, luego agregue agua hasta la mitad del tubo de ensayo, agite y observe.
b) En un tubo de ensayo coloque agua hasta la mitad y agregue almidón con la punta de la espatula, agite y observe.
c) Anote todas las observaciones y dibuje.
d) Escriba sus conclusiones.

PARTE II

I. Identificación de Lípidos

Marque dos tubos de ensayo como A y B

a) en el tubo A coloque un poco de aceite y agregue una o dos gotas de tinta roja, en el tubo B vierta la misma cantidad de aceite con dos gotas de Sudan, observe, anote y dibuje.
b) Macere un maní sin cascara y colóquela en un vidrio dereloj, luego agregue una gota de Sudan III. Observe, describa y dibuje.
c) Frote papel de china blanco con un pedazo de tocino hasta que quede una mancha traslúcida en el papel y agregue una gota de Sudan III a la mancha. Anote, Observe y dibuje.
d) Agregue una gota de Sudan III al pedazo de tocino. Observe, describa y dibuje.

Preguntas

1. ¿Qué observó en el tubo de ensayo A?
2. ¿Qué observó en el tubo de ensayo B?
3. ¿Qué ocurrió al poner en contacto el maní con el Sudan?
4. ¿Qué sucedió con el papel de china y el tocino al agregar Sudan?
5. Escriba sus conclusiones

II. Identificación de Proteínas

a) Coloque en un vidrio de reloj un trozo de clara de huevo cocido y un pedazo de queso, agregue una gota de acido nítrico a cada uno, observe y dibuje.
b) En otro vidrio de reloj ponga el pedacito de carne de res y agregue una gota de acido nítrico. Observe y dibuje.

Preguntas

1. ¿Qué sucedió con la clara de huevo cocido, el queso y la carne?
2. ¿Por qué ocurrió?
3. Escriba sus conclusiones

III. Solubilidad de Lípidos

a) En un tubo de ensayo coloque 40 gotas de aceite y agréguele la misma cantidad de agua, agítelo y observe.
b) En otro tubo de ensayo coloque 40 gotas de aceite y agréguele éter, agítelo y observe. Anote todas sus observaciones. Dibuje. Escriba sus conclusiones

IV. Solubilidad de las Proteínas

a) Coloque un poco de clara de huevo crudo en un tubo de ensayo, luego agregue agua hasta la mitad, agite y observe. Tome nota de sus observaciones.
b) Coloque un cabella dentro de un tubo de ensayo, agregue agua hasta la mitad, agite y observe. Tome nota de sus observaciones y dibuje.

OBSERVACIÓN Y RESULTADOS

Parte 1
Procedimiento A. Presencia de Carbono yagua derivadas de organismos vivos.

Al colocar las muestras en la estufa, se obtienen los siguientes resultados:

|Muestra |Reacción |Color al finalizar la reacción |Material Biológico |
|Tocino |Pequeñas explosiones |Negro |Si |
|Carne |Pequeñas explosiones |Negro |Si |
|Azúcar |Se disolvió |Negro |Si |
|Naranja |Evaporación |Negro |Si |
|Manzana |Evaporación |Negro |Si |
|Almidón |Sin reacción |Sin cambio |Si |

Como puede observarse, la mayoría de muestras presenta un color negro después de la exposición al calor, a excepción del almidón. En algunas muestras se pueden observar pequeñas explosiones y otras una evaporación.

Procedimiento B. Identificación de Carbohidratos.

Se realiza la prueba vertiendo el reactivo Benedict, que tiene un color azulado, en los tubos de ensayo de cada muestra, obteniendo los siguientes resultados:

|Muestra |Reacción |Color en baño de María |Positivo |Negativo |
(Muestra + Benedict)
|Jugo denaranja |Cambio de color, verde-amarillento |Amarillo |X
|Cebolla |Amarillo |Amarillo |X
|Manzana |Verde-azulado |Amarillo |X
|Almidón |Azul-celeste |Celeste X |
|Agua |Azul-celeste |Celeste X |

Solubilidad de Carbohidratos

Tanto el azúcar como el almidón son carbohidratos. Al mezclar el agua y el azúcar y agitar, el azúcar se mezcla perfectamente. Se observa una coloración amarillenta. Es homogénea.

Al mezclar el agua y el almidón, y agitar, el agua te torna blanca. Después de dejar reposar se observa un precipitado. Mezcla heterogénea.

|Mezcla |Solubilidad |
|Azúcar + H2O |Soluble |
|Almidón + H2O |No soluble |

PARTE II

1. Identificación De Lípidos

El Sudan es un líquido de color rojo. Se realizan las diferentes pruebas con Sudan y se obtienen los siguientes resultados

|Mezcla |Solubilidad |Mezcla |Coloración |
|Sudan + Aceite |Soluble |Homogénea|Rojo-anaranjado |
|Sudan + Tinta |Insoluble |Heterogénea |Sin coloración |
|Sudan + Maní |Roja |
|Sudan + Tocino |Roja |
|Sudan + Tocino frotado en papel |Rojo-anaranjado |

2. Identificación de Proteínas

Al utilizar el acido nítrico (HNO3) en la carne, ésta se vuelve de un color café oscuro, sufre una decoloración. En el huevo cocido no se observa ninguna reacción, permanece sin alteraciones.

3. Solubilidad de Lípidos

Se realizan las mezclas de aceite con agua y de aceite con éter y se realizan las siguientes observaciones

|Mezcla |Solubilidad |
|Aceite + Agua |Insoluble |
|Aceite + Éter |Soluble |

4. Solubilidad de las Proteínas

Se realizan las pruebas para observar si las proteínas son solubles en agua, haciendo uso de una clara de huevo y un cabella, obteniendo los siguientes resultados

|Mezcla |Solubilidad |
|Clara de huevo + Agua |Insoluble ||Cabello + Agua |Insoluble |

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

Parte 1
Procedimiento A. Presencia de Carbono y agua derivadas de organismos vivos.
Cuando un material se expone al calor, pueden existir diversas reacciones en él. El color negro obtenido es característico de aquellas muestras que contienen carbono. Este elemento se encuentra presente en la materia organica en combinación con otros elementos como el oxígeno, hidrógeno, potasio, etc., debido a estas combinaciones se pueden observar pequeñas explosiones y evaporación de agua, al observar la evaporación que se obtiene de muestras como la naranja y manzana nos indica que existe presencia de agua en materias derivadas de organismos vivos. El almidón

Procedimiento B. Identificación de Carbohidratos.

Los Carbohidratos son moléculas que usualmente contienen carbono, hidrógeno y oxígeno en una proporción de 1:2:1. Los carbohidratos se clasifican como monosacaridos, disacaridos o polisacaridos, dependiendo del tamaño y la complejidad de la molécula. Los monosacaridos se componen de una sola molécula de azúcar. Cuando dos monosacaridos se unen se produce un disacarido, y cuando dos o mas se unen se produce un polisacarido.

La prueba de Benedict, se usa para detectar la presencia de azúcares reductores porque el reactivo de Benedict contiene cobre y éste se reduce en presencia de azúcares reductores. Durante esta reacción el azúcar se oxida. La reacción antes mencionada se conoce como una reacción oxidación-reducción (“REDOX”) porque la oxidación del azúcar sucede simultaneamente con la reacción de reducción del cobre.

• Oxidación: reacción en la cual una sustancia pierde electrones,recibe un oxígeno o es privada de hidrógeno.
• Reducción: reacción en la cual una sustancia gana electrones, es privada de oxígeno o recibe un atomo de hidrógeno.

Cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica calor, el color de la mezcla cambia de la siguiente manera

• naranja o ladrillo intenso- mayor abundancia de azúcares reductores.
• Verde- presencia de menos azúcares reductores.
• Azul- no hay presencia de azucares reductores.

Los resultados de la Prueba de Benedit pueden producir los siguientes resultados:
Color ladrillo: Positivo (concentración alta de azúcar)
Color verde: Positivo (concentración baja de azúcar)
Color azul: Negativo

Debido a esto, el reactivo Benedict reacciono con casi todas las muestras a excepción del almidón, y esto se debe a que es un azúcar no reductor. Los azúcares No Reductores son aquellos que se unen cuando 2 monosacaridos iguales o diferentes se unen y forman un disacarido. La reacción Benedict no tiene efecto sobre ellos lo cual los determina como azúcares no reductores, por ej la Sacarosa ( glucosa + fructosa ) Maltosa, Trehalosa, etc., son azúcares no reductores y por lo tanto no tendran reacción ante el Benedict.

Parte 2
Identificación de Lípidos

Los llípidos, igual que los carbohidratos, son una fuente importante de energía almacenada. Son componentes importantes de las membranas celulares, de algunas vitaminas, de ciertas hormonas y del colesterol.Son solubles en solventes no-polares y son muy poco solubles en agua porque se componen principalmente de cadenas de hidrocarbonos.

El reactivo de Sudan poseen un color rojo, y produce una reacción hidrofóbica donde los grupos no-polares (los hidrocarbonos) se agrupan y son rodeados por moléculasdel reactivo. La prueba de Sudan tiñe los hidrocarbonos de rojo.

Los resultados de la Prueba de Sudan se dan de la manera siguiente
 
Color rojo: Positivo (contiene cadenas de hidrocarbonos)
 
Color original o transparente: Negativo

Es por esto que el Sudan tiño a todas las muestras, ya que todas eran lípidos. De esta manera podemos observar cuales muestras son lípidas. La tinta roja por estar compuesta de agua, no se logro mezclar y menos teñir la muestra de color rojo.

Identificación de Proteínas

Las proteínas, son componentes estructurales de las células, controlan sus procesos metabólicos y actúan como mensajeros químicos. Son parte importante de los anticuerpos, enzimas y receptores celulares, y estan formadas por cadenas de aminoacidos. Debido a la presencia de los grupos amino y carboxilo, los aminoacidos resisten cambios en pH y son amortiguadores importantes en soluciones biológicas.

Para identificar las proteínas se hace uso del acido nítrico, lo cual produce una reacción xantoproteica, que es un método que se puede utilizar para determinar la cantidad de proteína, empleando acido nítrico concentrado. El cambio en la coloración de la carne nos indica que existen proteínas en ella. La clara de huevo no se vio afectada a pesar de ser una proteína también, esto se debe a que ya esta desnaturalizada, la desnaturalización es un cambio estructural de las proteínas o acidos nucleicos, donde pierden su estructura nativa, y de esta forma su óptimo funcionamiento y a veces también cambian sus propiedades físico-químicas, y debido a este cambio químico, la clara de huevo no ha reaccionado. Por esto es muy importante identificar los factores a que ha estado expuesta una muestra para comprender si al realizar la prueba ésta se vera afectada.