I. INTRODUCCIÓN
El presente trabajo se llevó a cabo para comprobar la existencia de
bacterias que provocan mastitis encontradas en moscas recolectadas a los
alrededores del ganado y leche extraída de los bovinos que presentan la
enfermedad, con el reconocimiento de estas bacterias se puede deducir que las
moscas son uno de los principales vectores que portan las bacterias que
provocan dicha enfermedad.
El analisis se realizó con la captura de moscas de distintos
establos y de la misma manera con la leche, se realizó una
disolución con agua destilada con las moscas y se sembró, para la
leche se tomó una muestra con una aza y se sembró, esto se
realizó en agar sangre y posteriormente se resembro en un agar
específico como el agar Sabouraud para la Staphylococus aureus, de esta
manera fue posible la observación de los MO que se encontraron en la
leche y las moscas. Este analisis se realizó en las instalaciones
de laboratorio de la Universidad Politécnica de Zacatecas.
El estudio que se realizó fue con pocas muestras de moscas y leche
debido al poco espacio disponible en el laboratorio de la Universidad ya que
estas requieren mantenerse en una temperatura optima.
Se sabe que las moscas son portadoras de bacterias que las trasportan de un
lugar a otro. Siendo las moscas un vector importante de gérmenes causantes
de mastitis, es necesario controlarlas. Las moscas son portadoras de
microorganismos capaces de contagiar al ganado bovino de mastitis. La
proliferación de dichas bacterias se asocia a la forma en que la mosca
se alimenta y esproducto de cómo digiere sus alimentos.
La mosca se alimenta de elementos o productos sólidos, pero para lograr
digerirlos, tiene la necesidad de producir una licuación de los mismos,
y lo hace a través de la generación de saliva. Es muy
común que las moscas al comenzar a comer, vomiten lo que esta
dentro de su estómago. Como complemento del riesgo que presenta
la forma de alimentarse de dicho insecto, se le suma que, con gran frecuencia,
estos insectos también defecan cuando comen.
Aparte de la limpieza del establo y el control de las moscas adultas, la clave
del éxito esta en el control de las larvas mediante un buen
manejo del guano y, si es necesario, de la aplicación sistematica
de cal o de larvicidas específicos sobre el guano húmedo:
pentaclorofenato de sodio, clormetiuron (Dimilín de Roussell),
ciromazina (Neporex de Ciba-Geigy) u otros.
Existe una gran variedad de especies de moscas que perjudican las explotaciones
ganaderas y son de importancia económica y productiva, denominadas
chupadoras y moscas picadoras.
El termino mastitis se deriva de las palabras griegas “mastos” que
significa “pechos” e “itis” que quiere decir
“infamación de”. La inflamación es la respuesta de
los tejidos productores de leche en la ubre3 a una lesión
traumatica o la presencia de microorganismos infecciosos que han
ingresado a la ubre. El complejo inflamatorio de la glandula mamaria
puede ser primario o secundario, agudo o crónico, con la
alteración anatómica y funcional, las cual resulta de la
interacción entre agentes infecciosas y malas practicas demanejo.
(Figueroa, et al, 2009).
La característica principal de esta enfermedad son los leucocitos que se
detectan cuando se realiza la presencia de las células somaticas.
En vacas sanas y en condiciones normales, su concentración se
sitúa por debajo de las 300.000 células/ml (cls./ml).alcanzando
valores superiores a las 800.00cls./ml al aparecer la infección.
(Buxadè 2009).
1.1 MASTITIS CAUSADA POR BACTERIAS
Mastitis subclìnica causada por el Staphylococcus aureus.
Este germen puede penetrar a la ubre y provocar procesos infecciosos profundos
de los tejidos productores de la glandula mamaria. El reservorio de la
infección para el hato lechero es la ubre infectada. La mayoría
de los casos de enfermedades subclinicas con este germen se desarrolla lentamente
y si manifestaciones externas marcadas. (Medina
1967)
Mastitis subclínica causada por el Streptococcus agalactiae.
Se ha considerado como
“patógeno verdadero de la ubre”, pues es el único que
para desarrollarse y sobrevivir necesita encontrarse dentro de la ubre, en la
leche. Una vez que sale de la ubre contaminando gotas de leche, puede
sobrevivir muy corto tiempo en el medio ambiente, por lo tanto, es susceptible
de ser erradicado del
hato, lo que no es posible con los demas gérmenes causantes de
mastitis. Este microorganismo penetra la ubre aun no desarrollada de las
terneras, en los casos en que estas se críen juntas y tengan la
posibilidad de contacto con la leche proveniente de vacas infectadas; al chupar
una a otra los pezones, el germen puede ser introducido a la glandula
enformación, donde puede sobrevivir por un largo periodo de tiempo y
manifestarse solamente después del primer parto, durante la lactancia. (Medina 1967)
Mastitis causadas por Escherichia Coli.
Este germen produce una toxina, la endotoxina que es la que promueve los
síntomas de la mastitis y se considera como una toxicosis. El E.coli ataca
generalmente un solo cuarto y principalmente cuartos posteriores. La
predisposición de la infección por coliformes es mas alta
durante las primeras cuatro semanas posteriores al parto y después
disminuye progresivamente. (Medina
1967)
1.2 VECTORES DE AGENTES PATOGENOS
Musca domestica
Esta mosca es con frecuencia la mas abundante en areas de crianza
de ganado. Los adultos pueden ser vistos en cualquier substrato alrededor de
animales, incluyendo el alimento, excremento, vegetación, paredes y
techo de la estructura. Son vectores mecanicos importantes de
patógenos entéricos. Las larvas de la mosca se alimentan de las
secreciones y del
tejido, lo que agrava la condición pues retaza el que la herida
cicatrice.
(Rivero,1984)
Stomoxys calcitrans(mosca de establo)
Tienen aproximadamente el tamaño de una mosca común, es de color
gris y mantiene la cabeza hacia arriba cuando se posa sobre el animal. Se
reconoce facilmente por tener una probosis prominente y puntiaguda; su
picadura es bastante dolorosa. Sus huevos los deposita sobre el material
vegetal en descomposición. Se localiza principalmente en las
instalaciones ganaderas y es un vector mecanico de infecciones como Diarrea Viral
Bovina, Anemia infecciosaEquina y carbunco entre otras. (Rivero,1984)
Haematobia Irritans (Mosca del cuerno)
Es un insecto hematófago, es la mas pequeña de las moscas
picadoras, de los mas persistentes y molestos parasitos externos del ganado. Su nombre
común se debe al habito de congregarse alrededor de los cuernos, no
obstante, es frecuente encontrarla en la cabeza, dorso o abdomen de los
animales, extrayendo sangre unas 20 veces al día. El comportamiento de
esta mosca es muy particular ya que permanece practicamente todo el
tiempo sobre el mismo animal, día y noche, solo lo deja para pasar a
otro animal o para colocar sus huevos en la materia fecal fresca. Se considera
un factor de riesgo para infecciones intramamarias ya que es portador de
Staphylococcus spp. (Rivero,1984)
1.1 ANTECEDENTES
Los primeros reportes sobre la etilogía de la enfermedad fueron
realizados por Nocard y Mollereau.
Estos investigadores no dieron nombre específico a los agentes aislados.
En 1840, Guilleveau dió gel nombre de Streptococcus mastitis sporadicae
a los organismos aislados en los casos esporadicos de Mastitis y
Streptococcus mastitis contagiasae a los encontrados en los casos de Mastitis
enzooticas. (Figueroa, et al, 2009)
En 1884 ,Rosembach aislò y clasificó sistematicamente otros
germenes presentes en las infecciones de la ubre que llamo Micrococcus,
posteriormente clasificados como
Staphylococcus basandose para ello en la capacidad de producir pigmentos .
(Figueroa, et al, 2009)
En los años comprendidos entre 1890-1945 la bacteriologia de las
Mastitis estuvoencaminada a descubrir metodos de laboratorio especificos para
clasificar los Streptococcus y Staphylococcus. (Figueroa, et al, 2009)
El descubrimiento de los antibioticos bajo las pérdidas causadas por la
Mastitis, reduciendo la incidencia de cuartos ciegos;no obstante los
síntomas clínicos de la enfermedad, favorese asi el incremento de
la resistencia
de los germenes. (Figueroa, et al, 2009)
Murphy en 1958, realizó estudios sobre la frecuencia de germenes que
inciden en la Mastitis obina, llegando a las conclusiones siguientes:
a- Aproximadamente el 50% de las vacas de ordeño tienen uno o mas
cuartos infectados.
b- El Staphylococcus agalactiae se encuentra presente en la mitad de estas
infecciones .
c- En la mayoria de las infecciones , el Staphylococcus aureus y varias
especies de Staphylococcus fueron sus agentes causales.
d- Un porcentaje elevado de formas severas de Mastitis clínicas , fueron
causadas por Corynebacterium pyogenes , Escherichia coli, y en menos grado por
Streptococcus agalactiae, otros Streptococcus y Staphylococcus aureus .
e- Solamente el 1% de los animales infectados presentó sintomas
clínicos severos.
En 1970 Dodd-Neave realizaron en Reino Unido, Estados Unidos, estudios
similares a los de Muphy llegando a las siguientes conclusiones:
a- El 50% de vacas lecheras tienen uno o mas cuartos sub-clínicamente
enfermos.
b- El 2% de los animales enfermos mostraron síntomas clínicos
severos de las enfermedad.
c- El 90% de las infecciones fueron causadas por Staphylococcus
aureus,Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae y Streptococcus
uberis.
d- Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, y Corynebacterium pyogenes
causaron menos del
10% de estas infecciones. (Figueroa, et al, 2009).
Estudios realizados hacia fines de la década del 70 en 320 muestras de leche provenientes
de 40 establecimientos lecheros, 12 con ordeño manual y 28 con
ordeño mecanico, del Depto. Las Colonias, seleccionadas sobre la
base de su positividad al test de mastitis California(TMC) grados 2 y 3, y a la
exploración clínica de la glandula mamaria, mostraron una
elevada prevalencia de Staphylococcus aureus (54%), Streptococcus agalactiae
(23%) y Pseudomonas aeruginosa (13%) (Tessi et al, 1979).
Trabajos realizados a fines de la década del 80 sobre leche compuesta
(alícuotas de los cuatro cuartos) de 1.150 vacas provenientes de 39
tambos, seleccionados entre 240 establecimientos que integraban un programa de
bonificación por calidad de leche, ubicados en los Deptos. Castellanos y
Las Colonias de la provincia de Santa Fe,
mostraron un predominio de S. aureus (21,7%) entre los patógenos mayores
aislados, seguido por organismos del
género Streptococcus (12,5%). Entre estos últimos, las especies
predominantes fueron Streptococcus dysgalactiae y Streptococcus agalactiae (5,9
y 2,7%, respectivamente), mientras que entre los patógenos menores se
aislaron Corynebacterium spp. (43,9%), Micrococcus spp. (9,7%) y Staphylococcus
coagulasa negativos (SCN) (6,6%) (Calvinho et al, 1991).
Los patógenos mayores se distribuyeron en el 95% de lostambos y en el
22,6% de las vacas. Ademas, el patógeno mayor mas
difundido fue S. aureus (87% de los tambos), seguido por S. dysgalactiae (51%
de los tambos) (Calvinho et al, 1991).
Cabe destacar que solamente el 20% de los establecimientos aplicaban un
programa de control de mastitis basados en los cinco puntos tradicionales;
desinfección de pezones post ordeño, terapia antibiótica
de casos clínicos, control periódico de la maquina de
ordeñar, terapia antibiótica de la vaca seca y descarte de
animales con infecciones intramamarias crónicas (Booth, 1981).
En un relevamiento realizado en 1977 sobre 30 establecimientos lecheros, 18 con
ordeño mecanico y 12 con ordeño manual, de los Deptos. Río Cuarto,
Tercero Arriba, Juarez Celman y Gral. San Martín, se
seleccionaron 300 muestras de cuartos mamarios con grados 2 y 3 de TMC. A
partir de estas muestras, el patógeno aislado en mayor frecuencia fue S.
aureus (43,27%), seguido por distintas especies del género Streptococcus. Entre estas
especies, la mas frecuentemente aislada fue Streptococcus uberis
(19,2%), seguida por S. agalactiae (13,5%) y S. dysgalactiae (5,3%)
(Gonzalez et al, 1980). Cabe destacar que S. aureus fue aislado a partir
de muestras obtenidas en todos los rodeos estudiados, mientras que S.
agalactiae y S. uberis del 83% y 97% de dichos rodeos, respectivamente
(Gonzalez et al, 1980). Posteriormente, en un estudio llevado a cabo
sobre 17 establecimientos lecheros de la zona centro sur de la provincia, se
recolectaron muestras de leche del 10 al 20% de las vacas en ordeño,
aplicando unatécnica de muestreo sistematico. Para
la cuantificación se consideraron solamente los cuartos mamarios con
aislamiento de un solo patógeno o falta de desarrollo bacteriano. Sobre
541 muestras procesadas, el 65,2% arrojó resultados negativos, mientras
que los patógenos mas frecuentemente aislados correspondieron a
distintas especies de SCN (12,2%), especies de estreptococos (8,13%) y S.
aureus (5,9%) (Giraudo et al, 1995).
Varios autores han caracterizado a los organismos causantes de mastitis
aislados a partir de muestras de mastitis subclínica provenientes de la
provincia de Buenos Aires, aunque incluyendo en menor medida muestras
provenientes de las provincias de Santa Fe y Entre Ríos (Chertcoff et
al, 1996).En un relevamiento realizado sobre 1.558 muestras de mastitis
subclínicas, que incluyó también un número no
especificado de muestras de mastitis clínicas, tomadas entre abril de
1994 y julio de 1996, se encontró que S. aureus y SCN fueron los
patógenos mas prevalentes, resultando en el 25,32 y 22% de las
muestras procesadas con aislamiento positivo (Chertcoff et al, 1996). En un
estudio realizado sobre 7.580 muestras compuestas de vacas pertenecientes a 38
rodeos lecheros ubicados en la provincia de Buenos Aires y Entre Ríos
entre diciembre de 1996 y octubre de 1997, mas del 50% de los organismos
aislados eran especies de Staphylococcus. Los patógenos mayores (FIL, 1999)
mas frecuentemente aislados fueron S. aureus (31,6%) y S. agalactiae
(11,6%) (Tirante et al, 1998).
En un estudio de similares características llevado a cabo entrenoviembre
de 1998 y agosto de 2000 sobre muestras compuestas de 9.704 vacas en 27 rodeos
se encontraron prevalencias menores de S. aureus (16,6%), aunque fue el
patógeno mayor mas frecuentemente aislado, seguido por especies
del género Streptococcus (Acuña et al, 2001). Un analisis
retrospectivo basado en el cultivo de muestras compuestas de cuartos de 16.065
vacas en ordeño pertenecientes a 74 establecimientos lecheros tomadas
entre diciembre de 1996 a marzo de 2000, de los cuales 63 estaban ubicados en
la provincia de Buenos Aires, 7 en la provincia de Entre Ríos y 2 en la
provincia de Santa Fe, reveló una prevalencia de S. aureus de 21,9%, S.
agalactiae 5,8% (hallado en el 68,9% de los rodeos estudiados), Streptococcus
no agalactiae 4,3% y coliformes 2,03%. Los patógenos menores (FIL, 1999)
mas frecuentemente aislados fueron: Staphylococcus spp. 13,6% y
Corynebacterium spp 14,3% (Chaves et al, 2001).
En un relevamiento realizado sobre 17 tambos ubicados en la Cuenca Mar y
Sierras, se seleccionaron aleatoriamente 634 vacas (el 10 % de las vacas en
ordeño) para analisis bacteriológico de leche. La causa
mas frecuente de mastitis subclínica fueron distintas especies del género
Staphylococcus. La prevalencia encontrada fue de 13,9% para S. aureus y 16,6%
para SCN, encontrandose distribuidos en el 94,7% de los rodeos
estudiados. La prevalencia de organismos del
género Streptococcus fue de 1,6% para S. agalactiae y 6,5% para otras
especies (Mendieta et al, 2001).
II. JUSTIFICACIÓN:
Las moscas: Stomoxys calcitrans(mosca de establo),Muscadomestica(mosca
domestica) y Haematobia irritans(mosca del
cuerno) son vectores que transmiten el virus de la mastitis a los bovinos.
Estas provocan, mal aprovechamiento del
pastaje, retrasos en el crecimiento y menor producción de leche, es por
esto que se estudiaran las moscas ya mencionadas junto con la leche para
comprobar que son estas las que transmiten las bacterias causantes de esta
enfermedad ademas que generan costos para el lechero.
III. OBJETIVOS
3.1 OBJETIVO GENERAL:
Comprobar que las moscas tomadas de diferentes establos (Haematobia
Irritans, Stomoxys calcitrans, Musca domestica) son vectores de la
transmisión de la enfermedad de la mastitis.
3.2 OBEJETIVO ESPECIFICOS:
OBEJETIVO ESPECIFICOS:
* Identificación de bacterias: Staphylococus aureus, Streptococus
agalactiae y Escherichia coli en la Musca domestica.
* Identificación de bacterias: Staphylococus aureus, Streptococus
agalactiae y Escherichia coli en Haematobia Irritans
* Identificación de bacterias: Staphylococus aureus, Streptococus
agalactiae y Escherichia coli en Stomoxys calcitrans
* Identificación de bacterias: Staphylococus aureus, Streptococus
agalactiae y Escherichia coli en la leche.
IV. HIPOTESIS:
Las moscas Haematobia Irritans, Stomoxys calcitrans, Musca domestica son
portadoras de las bacterias: Staphylococus aureus, Streptococus agalactiae y
Escherichia coli que provocan la mastitis en el ganado bovino.
V. MATERIALES Y MÉTODOS
6.1 Materiales
Recursos Humanos:
Estudiantes de la carrera Ing. Biotecnología
AsesoraSahara Karina Mondragón Zavala
Lecheros de los establos del
municipio de Fresnillo.
De campo:
Automóvil
Ropa de trabajo.
Biológico:
Vacas lecheras (Raza Holstein Frisonas)
Haematobia Irritans, Stomoxys calcitrans, Musca domestica
La recolección de las moscas se realizo en Octubre 2009 y las muestras
de leche se tomaron en Abril 2010 los ranchos ya mencionados.
6.2 Metodología
Este trabajo se realizo en tres establos del
municipio de Fresnillo a la salida la Estación, se examinaron
aproximadamente 7 vacas las cuales presentaban características anormales
en la ubre (leche con sangre) a simple vista.
RECOLECCION DE LAS MUESTRAS.
Moscas
Se recolectaron moscas (Haematobia Irritans, Stomoxys calcitrans, musca
domestica) con bolsas de plastico, de las siguientes partes del cuerpo de la vaca:
lomo, patas, y cabeza de los tres establos, y se transportaron en bolsa de
plastico al laboratorio de la universidad, se refrigeraron a una
temperatura de -2ºC.
Leche
Las ubres se limpiaron en seco, se lavaron con una solución yodatada y
posteriormente se tomaron las muestras antes de comenzar el ordeño,
según lo reportado en la literatura el hecho de tomar las muestras
inmediatamente antes del
ordeño incrementa la posibilidad de detección de infección
mamaria.
Antes de tomar la muestra, se descartaron dos chorros de leche de cada cuarto.
De cada vaca se tomaron 15ml de leche, en tubos falcón; estas muestras
se llevaron refrigeradas al laboratorio de la universidad a una temperatura de
4ºC.
PROCEDIMIENTO EN ELLABORATORIO.
Cultivos bacteriológicos
Moscas
Para la siembra de cada mosca se separaron las moscas de acuerdo a su
morfología observada en el microscopio, y se separaron la Mosca
Domestica y la Haematobia Irritans, estas se molieron en un mortero con
agua destilada y en el caso de la Stomoxys calcitrans solo se molió la
cabecilla, separandola del cuerpo de las moscas con bisturí y
pinzas para la siembra en 3 placas de agar sangre(Anexo 1) por cada especie de
mosca.
Dicha siembra se llevo a cabo en condiciones asépticas utilizando etanol
para esterilizar el area de trabajo, y el mechero para evitar cualquier
patógeno que pueda contaminar. Se realizo una siembra en estría
utilizando un asa y se incubo en la estufa hasta encontrar crecimiento
bacteriano, esto fue aproximadamente en 24 horas y a una temperatura de
37º C.
Posteriormente se realizo una resiembra en 2 placas de agar Mac Conkey (Anexo
2) y 2 placas de Saboraud (Anexo 3) por cada especie de mosca.
Finalmente se realizo tinción gram (Anexo 4) de cada placa utilizando 3
pruebas por placa y se observo en el microscopio con los objetivos de 10X, 40X,
100X.
Leche
Las muestras se procesaron en el curso de pocas horas empezando por la prueba
de california
mastitis (CMT) (Anexo 5). Las muestras que dieron reacción positiva se
cultivaron bacteriológicamente. Las muestras se cultivaron en 3 placas
de agar Sangre para la identificación de la población bacteriana.
Las muestras de leche se homogenizaron varias veces y atemperaron antes de
inocular las placas, después se incubodurante aproximadamente 48 horas y
37ºC, y se observo el crecimiento.
Posteriormente se realizo la siembra en agares específicos Saboraud y
Mac Conkey, 2 placas de agar Saboraud y en 1 placa de agar Mac Conkey por cada
muestra de leche.
Finalmente se realizo la tinción gram de cada placa 3 pruebas por placa
y se observo en el microscopio con los objetivos de 10X, 40X, 100X para su
posible identificación.
VI. RESULTADOS Y DISCUSION
Los resultados se agruparon de acuerdo a los establos donde se tomaron las
muestras.
En el cuadro 1 se presentan la cantidad de moscas recolectadas en cada establo.
Cuadro 1. Cantidad de moscas recolectadas.
Establo | Stomoxys calcitrans | Domestica | Haematobia irritans | Moscas
totales |
1 | 7 | 8 | 5 | 20 |
2 | 3 | 15 | 12 | 30 |
3 | 4 | 16 | 5 | 25 |
Cuadro 2.Cultivos bacteriológicos de moscas.
PLACAS
MOSCAS | Agar Sangre | Agar Sabouraud | Agar Mac Conkey |
Stomoxys Calcitrans | 3 | 2 | 2 |
Domestica | 3 | 2 | 2 |
Haematobia Irritans | 3 | 2 | 2 |
Mediante revisión de literatura y a la cantidad de moscas recolectadas
se determino el número de placas para la siembra de cada especie de
mosca.
Cuadro 3.Prueba california.
ESTABLOS | POSITIVO | NEGATIVO |
1 | 1 | 2 |
2 | 1 | 1 |
3 | 1 | 1 |
En el cuadro 3 se puede observar la proporción de casos negativos y
positivos. Debido a la formación de gel cuando se mezcla la muestra de
leche se considero 3 positivos y 4 negativos de los 3 establos analizados. Las
muestras negativas se desecharon.
Cuadro 4.Cultivo bacteriológico en leche de acuerdo a la CMT.
PLACAS
Establos | Agar Sangre | Agar sabouraud | Agar Mac Conkey |
1 | 1 | 2 | 1 |
2 | 1 | 2 | 1 |
3 | 1 | 2 | 1 |
Mediante revisión de literatura y a las reacciones positivas de la
prueba california se determino el número de placas para la siembra de
cada muestra de leche.
Figura 1. Número de casos CMT negativos y positivos.
TINCIÓN GRAM
Prueba 1
Siembra de moscas en Agar sangre.
Stomoxys calcitrans.
Figura2. Tinción gram del
cultivo de Stomoxys calcitrans. Se obtuvo E. coli.
Mosca Domestica
Figura 3. Tincion gram del
cultivo de Mosca Domestica . Se obtuvo E. coli.
Hematobia Irritans.
Figura 4. Tincion gram del
cultivo de Hematobia Irritans. Se obtuvo Streptococcus Agalactiae.
Siembra de leche en Agar sangre.
Establo 1.
Figura 5. Tinción gram del cultivo del establo 1 .Se obtuvo
E-coli.
Establo 2.
Figura 6. Tinción gram del cultivo del establo 2. Se obtuvo
E.coli.
Establo 3.
Figura 7. Tinción gram del cultivo del establo 3. Se obtuvo
E.coli.
PRUEBA 2
Siembra de moscas en Agar especifico.
Mosca Stomoxys calcitrans en Agar sabouraud.
Figura 8. Tinción gram del
cultivo de stomoxys calcitrans. Se obtuvo staphylococos aureus.
Mosca Stomoxys calcitrans en Agar Mac Conkey
Nota: No hubo crecimiento bacteriano.
Mosca domestica en Agar Sabouraud
Nota: No hubo crecimiento bacteriano.
Mosca domestica en Agar Mac ConkeyNota: No hubo crecimiento bacteriano.
Mosca Haematobia Irritans en Agar Saboruraud
Figura 9. Tinción gram del
cultivo de Haematobia Irritans. Se obtuvo staphylococos aureus.
Mosca Haematobia Irritans en Agar Mac Conkey
Nota: No hubo crecimiento bacteriano
Siembra de leche en Agar especifico.
Establo 1. Agar sabouraud
Figura 10. Tinción gram del
establo 1. Se obtuvo staphylococos aureus.
Agar Mac Conkey
Figura 11. Tinción gram del
establo 1. Se obtuvo E.coli.
Establo 2. Agar sabouraud
Figura12. Tinción gram del
establo 2. Se obtuvo staphylococos aureus.
Agar Mac Conkey
No hubo crecimiento bacteriano
Establo 3. Agar sabouraud
Figura13. Tinción gram del
establo 3. Se obtuvo Streptococcus Agalactiae.
Agar Mac Conkey
No hubo crecimiento bacteriano
RESULTADOS REPORTADOS EN TABLAS: BACTERIAS ENCONTRADAS
Prueba 1.
Cuadro 5. En la mayoría de los casos predomina E.coli tanto en muestras
de leche como
en moscas.
AGAR SANGRE |
Moscas | Bacterias |
S.calcitrans | E coli |
Domestica | E coli |
Hematobia | Stresptoccocos agalactae |
Establo 1 | E coli |
Establo 2 | E coli |
Establo 3 | E coli |
Prueba 2.
Cuadro 6. En la mayoría de los casos hubo mayor prevalencia de
Staphyloccocus Aureus tanto en muestras de leche como en moscas.
AGAR SABOURAUD |
Moscas | Bacterias |
S.calcitrans | Staphyloccocus Aureus |
Domestica | No hubo crecimiento |
Hematobia | Staphyloccocos Aureus |
Establo 1 | Staphyloccocos Aureus |
Establo 2 |Staphyloccocos Aureus |
Establo 3 | Streptococcus Agalactiae |
Cuadro 7. Crecimiento de E.coli en Agar Macconkey
AGAR MAC CONKEY |
Moscas | Bacterias |
S.calcitrans | No hubo crecimiento |
Domestica | No hubo crecimiento |
Hematobia | No hubo crecimiento |
Establo 1 | E coli |
Establo 2 | No hubo crecimiento |
Establo 3 | No hubo crecimiento |
Figura 14. Mayor a menor prevalencia de bacterias mas comunes productoras de
mastitis
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados reportados se cumplió con los objetivos
debido a que se identifico las mismas bacterias tanto en muestras de leche como
en cada especie de mosca, con esto se demuestra que la mosca es un vector de
transmisión de la enfermedad de la mastitis.
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VIII. ANEXOS
Método de California:
Para ejecutar la prueba se utiliza como reactivo el Alkil Aril Sulfonato, el
cual reacciona con el acido dexorribonucleico (DNA) contenido en los
Leucocitos detectando Mastitis Clínica y Subclínica.
Ademas esta prueba contiene el indicador púrpura de Bromocresol,
para detectar cambios de pH, así como la paleta de cuatro
compartimientos.
Pasos California Mastitis:
1. Colocar de 2 a 4 ml. de leche en vaso de precipitados.
2. Agregar igual reactivo de California.
3. Agitar en forma circular de 10 a 20 segundos.
4. Interpretar resultado.
La prueba de California Mastitis Test esta basada en el Hecho de que la
leche contiene una cantidad de células, especialmente leucocitos, mayor
que en la leche normal.
Se forma un gel que se observa directamente; la rapidez con que se forma la
firmeza que adquiere indica la cantidad e leucocitos en la leche.
(M.V Ordóñez,et al, 2004)
(Portal veterinaria, 2001).
