ANTIBIOGRAMA

Introducción En nuestros días han sido puestos a nuestra disposición para la lucha contra las enfermedades bacterianas gran cantidad de agentes antibacterianos. Los antibióticos son sustancias químicas producidas por microorganismos o derivados semisintéticos de éstas, mientras que los quimioterápicos son productos de síntesis química, pero ambos tienen la propiedad de estar dotados de actividad antibacteriana. Todas las bacterias no tienen la misma sensibilidad a los distintos antibacterianos. La evaluación de esta sensibilidad nos va a ayudar en la selección del compuesto más adecuado para el tratamiento de una infección bacteriana. Las pruebas más utilizadas para evaluar la sensibilidad de una bacteria a un agente antibacteriano están basadas en el enfrentamiento in vitro de la bacteria con distintas concentraciones del agente. • Concentración mínima inhibitoria (CMI) se define como la menor concentración de antimicrobiano capaz de inhibir el desarrollo de una cepa bacteriana dada. • Concentración mínima bactericida (CMB) se define como la menorconcentración de antimicrobiano capaz de destruir una cepa bacteriana dada. Fundamento El antibiograma por el método de difusión en agar es una prueba en la que se enfrenta la bacteria inoculada sobre la superficie de un medio de agar con una solución antibiótica absorbida en discos de papel de filtro. Este método está estandarizado y los halos de inhibición han sido obtenidos correlacionándolos con las CMI y aparecen en unas tablas. Hay varios factores que afectan al halo de inhibición: la carga del antibiótico en los discos, la difusión del antibiótico en el medio de cultivo, el tamaño del inóculo bacteriano, la composición y grosor del medio de cultivo, la velocidad del crecimiento bacteriano y el tiempo de incubación. Los discos de antibióticos son adquiridos comercialmente. Deben contener la cantidad establecida de antibiótico y ser conservados a 4sC protegidos de la humedad.

El inóculo bacteriano debe tener una turbidez similar al 0 de la escala 8 de McFarland, aproximadamente 10 UFC/ml y ser preparado en solución salina estéril o caldo de cultivo. Objetivos Determinar la sensibilidad bacteriana a distintos antibióticos utilizando metodología sencilla y asequible a cualquier laboratorio de Microbiología. Material necesario - Cultivo puro de Staphylococcus aureus y Escherichia coli. - Placas de LB agar. - Discos comerciales de antibióticos. - Hisopos estériles - Pinzas de laboratorio. Realización 1. Preparación del inóculo. Partiendo de un cultivo puro tomar con el asa de siembra X colonias dela bacteria e introducirlas en el caldo de cultivo. La turbidez del inóculo debe equivaler al estandar 0 de McFarland. 2. Inocular la superficie de una placa de agar con el hisopo pasándolo uniformemente por toda la superficie en tres direcciones. Por último, pasar el hisopo por el reborde de la placa de agar. Dejar secar 5 minutos. Colocar los discos de antitióticos sobre la superficie del agar utilizando unas pinzas estériles y apretándolos suavemente sobre la superficie del agar. Los discos no deben estar a menos de 15 mm de los bordes de la placa y lo bastante separados entre ellos para que no se superpongan sus zonas de ihnibición. Dejar las placas 15 minutos a temperatura ambiente para que comiencen a difundir los antibióticos. 3. Incubar la placa en posición invertida a 37sC durante 18-24 horas. 4. Medir los diámetros de los halos de inhibición con una regla. Ensayo cualitativo: un mismo cultivo se enfrenta a distintas soluciones antibióticas. Ensayo cuantitativo: un mismo cultivo se enfrenta a un sólo antibiótico, preparado a distintas concentraciones.

I. Selección Múltiple

1. A una célula en etapa G2 se le aplica una droga que inhibe específicamente la replicación de su ADN. ¿ Cual de los siguientes graficos representa los efectos de tal situación?

2. En el proceso meiótico, la metafase I se diferencia de la metafase II en que
I. en la metafase I hay duplicación de material genético y en la metafase II no se produce esta duplicación.
II. en la primera los homólogos se encuentran apareados en el ecuador y en la segunda sólo se ven cromosomas sin aparear y en menor número.
III. los centríolos se ubican en los polos en ambas metafases.
A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo III
D) Sólo I y II

3. El entrecruzamiento de los cromosomas homólogos (crossing-over) se produce en

A) la profase de la segunda división meiótica.
B) la metafase de la primera división meiótica.
C) la profase de la primera división meiótica.
D) la metafase de la segunda división meiótica.

4. La importancia de la meiosis radica en que
I. mantiene del número de cromosomas de la especie y otorga variabilidad a la descendencia.
II. se produce el entrecruzamiento de los cromosomas homólogos.
III. la combinación al azar de los cromosomas determina una gran variedad de gametos.
A) Sólo I
B)Sólo III
C) Sólo II y III
D) I, II y III

5. La célula que termina la meiosis I es
A) 2n cromosomas y 4c ADN.
B)n cromosomas y c ADN.
C) n cromosomas y 2c ADN.
D) 2n cromosomas y 2c ADN.

6. El esquema muestra un par de cromosomas homólogos, señale

1. Par de cromosomas. 2. Proceso cromosómico que origina un bivalente de2 cromosomas. 3. Puntos de unión de los cromosomas quiasmas. 4. Número de cromatidas de la pareja de cromosomas. 5. Etapa meiótica.

A) 1/Homólogos. 2/Sinaptico. 3/Quiasmas. 4/4 cromatidas. 5 / Profase I. B) 1/no Homólogos. 2/ Sinaptico. 3/Paquiteno. 4/2 Cromosomas. 5/ Metafase.

C) 1/Homólogos. 2/Sinaptonemico. 3/Quiasmas. 4/4 Cromosomas. 5/Anafase.

D) 1/Homólogos. 2/Sinaptico. 3/Quiasmas. 4/4 cromatidas. 5 / Profase II.


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7. La variabilidad genética que aporta la meiosis se produce en: ( Conocimiento)
A) Profase II.
B) Profase I
C) Anafase I.
D ) Anafase II

8. Qué diferencia(s) existe(n) entre la metafase de la mitosis y la metafase I de la meiosis?
I. En la mitosis, los cromosomas se disponen alineados en el ecuador y en la meiosis, a ambos lados del ecuador.
II. En la mitosis, las cromatidas hermanas migran a polos opuestos y en la meiosis, se separan los cromosomas homólogos.
III. En la mitosis, el plano ecuatorial es paralelo al eje de los centríolos y en la meiosis, es perpendicular.
A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo III
D) Sólo I y II

9. En la fecundación parti
Esquema: preparación de los discos impregnados de antibiótico para realizar un antibiograma. Tomado de https://personales.ya.com/erfac/practi/microbi3.htm

Interpretación de los resultados Los diámetros de los halos de ihnibición se traducen a las categorias de resistente (R), intermedio (I), moderadamente sensible (MS) o sensible (S).