INTRODUCCIÓN
Trabajo Practico N° 3:
Preparación del material para el trabajo en Microbiología Limpieza y Esterilización
En el trabajo del laboratorio de Microbiología tienen importantísima aplicación los procedimientos, técnicas y productos que suprimen o disminuyen la vitalidad de los microorganismos patógenos.
No existe un procedimiento de esterilización y desinfección aplicable a todos los casos. El método de esterilización sera seleccionado para cada caso teniendo en cuenta la naturaleza física del objeto y la naturaleza biológica del contaminante. Como rara vez se conoce la población de microorganismos sobre un objeto que debe ser tratado, debemos presuponer que se encuentran presentes las formas microbianas mas resistentes: las endosporas.

El método de esterilización a emplearse debe ser previamente valorado.
Actualmente existen valores tabulados de tiempo de exposición, temperatura y concentración de principios activos para los métodos de esterilización mas usados que nos permiten elegir el mas adecuado para cada caso. En la elección debe tenerse en cuenta también el uso posterior que le sera dado (ono) al objeto a esterilizar.
Para asegurar el éxito de un proceso esterilizante es necesario considerar las siguientes pautas:
1. Esterilización previa: Sera necesaria cuando el material y/ o equipos hayan sido utilizados con material infeccioso o presunto infeccioso, por ejemplo placas de Petri inoculadas, tubos conteniendo cultivos de microorganismos, frascos empleados en el cepario, etc. Seran esterilizados en autoclave a 1 atm. de presión durante 15 – 30 minutos.
Para las pipetas, micropipetas y tubos de hemólisis puede emplearse este método o sumergirlas inmediatamente después de ser utilizadas en solución desinfectante de formol al 10 % durante una hora.
2. Limpieza previa: Se realizara para eliminar las partes gruesas de suciedad o residuos no infecciosos (gratitud, resto de pegamento, cinta adhesiva, carbono, tinta de rotulado, etc.). Se empleara el raspado con espatulas, cepillo, esponjas metalicas, paños, etc. Se enjuagara repetidas veces bajo el chorro de agua corriente a presión (conectando a la canilla un tapón perforado o tapando parcialmente con un dedo). Se aconseja un último enjuague con aguadestilada. Se dejara secar en canasto o rejilla de alambre boca abajo a temperatura ambiente o estufa a 60 – 80 °C.
Son ejemplos característicos de esto los pinzones de las islas Galapagos que fueron estudiados por Darwin, los Drepanidos, aves de las islas Hawaii, o las grandes aves no voladoras distribuidas por el hemisferio sur


-Paleontológicas
Demuestra la existencia de un proceso de cambio, mediante la presencia de restos fósiles de flora y fauna extinguida y su distribución en los estratos. Numerosas formas indican puentes entre dos grupos deseres, como es una forma intermedia entre reptil y ave presentada por el Archaeopteryx, verdadero ejemplo de la evolución desde los pequeños dinosaurios del Mesozoico y las aves actuales. Otro ejemplo es la evolución de los caballos para adaptarse a las grandes praderas abiertas por las que corrían.
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Archaeopteryx

-Moleculares
Existe una gran uniformidad en los componentes moleculares de los seres vivos. Tanto en las bacterias y otros microorganismos como en organismos superiores (vegetales y animales), la información esta expresada como secuencias de nucleótidos, que se traducen en proteínas formadas por los mismos veinte aminoacidos.
Esta uniformidad de las estructuras moleculares revela la existencia de ancestros comunes para todos los organismos y la continuidad genética de estos.
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Teorías

-Teoría Darwinista: selección natural
La selección natural es un mecanismo evolutivo que se define como la reproducción diferencial de los genotipos en el seno de una población biológica. La formulación clasica de la selección natural establece que las condiciones de un medio ambiente favorecen o dificultan, es decir, seleccionan la reproducción de los organismos vivos según sean sus peculiaridades. La selección natural fue propuesta por Darwin como medio para explicar la evolución biológica. Esta explicación parte de dos premisas. Laprimera de ellas afirma que entre los descendientes de un organismo hay una variación ciega (no aleatoria), no determinista, que es en parte heredable. La segunda premisa sostiene que esta variabilidad puede dar lugar a diferencias de supervivencia y de éxito reproductor, haciendo que algunas características de nueva aparición se puedan extender en la población. La acumulación de estos cambios a lo largo de las generaciones produciría todos los fenómenos evolutivos.

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-Teoría Sintética / neodarwinismo
La Teoría Sintética de la evolución incorpora las variaciones aleatorias o mutaciones de la información genética. Dicho mecanismo junto al de la selección natural producen la evolución en su conjunto.

Las diferencias importantes de la Teoría Sintética de la evolución con la Teoría de Darwin las podemos resumir en las siguientes:

(Admite el cambio genético aleatorio como un mecanismo de la evolución importante, en adición al mecanismo de la selección natural.

(Asume que los caracteres son heredados a través de los genes. Las variaciones de la población se deben a la presencia de múltiples variaciones de un gen.

(Por último, supone que la especialización se debe, normalmente, a pequeños cambios aleatorios en la información genética.

Dicho de otro modo, la Teoría Sintética incorpora los aspectos relativos a lamicro-evolución y supone que la macro-evolución es simplemente la acumulación de la micro-evolución.

-Lamarquismo
Formas de vida que no habían sido creadas y permanecían inmutables, como se aceptaba en su tiempo, sino que hab&iacut El material de vidrio que luego de este tratamiento aún quedase manchado sera sumergido en una solución sulfocrómica durante 24 hs (Este procedimiento lo realiza personal especializado del Droguero).
3. Preparación del material de vidrio: este acondicionamiento debe realizarse de manera tal de asegurar la perfecta esterilización del mismo en todos sus puntos y evitar la posterior contaminación.
a. Placas de Petri: se envuelven en papel madera según la técnica indicada por el instructor (se esterilizan en estufa a 160- 180ºC durante dos o una hora respectivamente).
b. Tubos de ensayos, tubos de hemólisis y tubos de Khan: se confecciona en tapón de algodón y se cubre con un capuchón de papel aluminio. (se esterilizan en estufa).
c. Pipetas: se obtura el extremo superior con un filtro de algodón y luego se envuelven con tiras de 4 a 5 cm. de ancho de papel madera comenzando por la punta de la misma. Debe rotularse cada una con la capacidad y graduación correspondiente (se esterilizan en estufa).