Reconocimiento de lípidos
MATERIALES * Tubos de ensayo * Gradilla * Varillas de vidrio * Mechero * Vasos de precipitados * Pipetas | * Solución de NaOH al 20% * Solución de Sudan III * Tinta china roja * Eter, cloroformo o acetona * Aceite de oliva |
1. SAPONIFICACIÓNFUNDAMENTO
Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potasico descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y acidos grasos. Éstos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potasicas de los acidos grasos. En los seres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de acidos grasos y glicerina.TÉCNICA
. Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.

. Agitar enérgicamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos.
. Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semisólida que es el jabón formado y una superior lipídica de aceite inalterado.
2. TINCIÓN     FUNDAMENTO
Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudan III.     TÉCNICA 1. Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite. 2. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólicade Sudan III. 3. Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja. 4. Agitar ambos tubos y dejar reposar. 5. Observar los resultados: en el tubo con Sudan III todo el aceite tiene que aparecer teñido, mientras que en el tubo con tinta, ésta se ira al fondo y el aceite no estara teñido.3. SOLUBILIDAD     FUNDAMENTO
Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes organicos, como el éter, cloroformo, acetona, benceno, etc.     TÉCNICA 1. Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo. 2. Añadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de éter u otro disolvente organico, 3. Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar. 4. Observar los resultados: Se vera cómo el aceite se ha disuelto en el éter y, en cambio no lo hace en el agua y el aceite subira debido a su menor densidad.CUESTIONES 1. ¿Qué son los jabones? 2. ¿Cómo se pueden obtener los jabones? 3. ¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa? 4. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas? 5. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudan III y aceite-tinta y explica a qué se debe la diferencia entre ambos resultados. 6. ¿Quéocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?¿Y con la de benceno y aceite?¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones? |

Reconocimiento de prótidos |
MATERIALES * Tubos de ensayo * Gradilla * Mechero * Vasos de precipitados * Pipetas | * Solución de HCl concentrado * Alcohol etílico * Solución de SO4Cu al 1% * NaOH al 20% * Clara de huevo o leche * Solución de albúmina al1-2% |
1. COAGULACIÓN DE LAS PROTEÍNAS     FUNDAMENTO
Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formandose coagulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, acidos, alcohol, etc.
La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.     TÉCNICA 1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche. 2. Calentar uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2-3ml de HCl concentrado y al tercero 2 o 3ml de alcohol etílico. 3. Observar los resultados.2. REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS (BIURET)     FUNDAMENTO
Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto parasu identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoacidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoacidos.
El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.     TÉCNICA 1. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solución de albúmina al 1-2%. 2. Añadir 4-5 gotas de solución de SO4Cu al 1%. 3. Añadir 3ml de solución de NaOH al 20%. 4. Agitar para que se mezcle bien. 5. Observar los resultados.
CUESTIONES 1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo? 2. ¿Cual de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalización? 3. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína? 4. ¿Qué coloración da la reacción del Biuret? 5. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret? 6. Si se realiza la reacción del Biuret sobre un aminoacido como la Glicina ¿es positiva o negativa? ¿Por qué? Reconocimiento de glúcidos |
MATERIALES * Tubos de ensayo * Gradilla * Pinzas * Mechero * Pipetas * Solución de Lugol | * Solución de Fehling A y B * Solución alcalina (sosa, potasa, bicarbonato, etc.) * ClH diluido * Soluciones al 5% de glucosa,maltosa, lactosa, fructosa, sacarosa y almidón. |
1. ESTUDIO DE AZÚCARES REDUCTORES     FUNDAMENTO
Los monosacaridos y la mayoría de los disacaridos poseen poder reductor, que deben al grupo carbonilo que tienen en su molécula. Este caracter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reacción redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre (II). Las soluciones de esta sal tienen color azul. Tras la reacción con el glúcido reductor se forma óxido de Cobre (I) de color rojo. De este modo, el cambio de color indica que se ha producido la citada reacción y que, por lo tanto, el glúcido presente es reductor.     TÉCNICA 1. Poner en los tubos de ensayo 3ml de la solución de glucosa, maltosa, lactosa fructosa o sacarosa (según indique el profesor). 2. Añadir 1ml de solución de Fehling A (contiene CuSO4) y 1ml de Fehling B (lleva NaOH para alcalinizar el medio y permitir la reacción) 3. Calentar los tubos a la llama del mechero hasta que hiervan. 4. La reacción sera positiva si la muestra se vuelve de color rojo y sera negativa si queda azul o cambia a un tono azul-verdoso. 5. Observar y anotar los resultados de los diferentes grupos de practicas con las distintas muestras de glúcidos.2. HIDRÓLISIS DE LA SACAROSA     FUNDAMENTO
La sacarosa es un disacarido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que carece de poder reductor y la reacción con el licor de Fehling es negativa, tal y como ha quedado demostrado en el experimento1. Sin embargo, en presencia de ClH y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacaridos que la forman, glucosa y fructosa, que sí son reductores. La prueba de que se ha verificado la hidrólisis se realiza con el licor de Fehling y, si el resultado es positivo, aparecera un precipitado rojo. Si el resultado es negativo, la hidrólisis no se ha realizado correctamente y si en el resultado final aparece una coloración verde en el tubo de ensayo se debe a una hidrólisis parcial de la sacarosa.     TÉCNICA 1. Tomar 3ml de solución de sacarosa y añadir 10 gotas de ClH diluido. 2. Calentar a la llama del mechero durante unos 5 minutos. 3. Dejar enfriar. 4. Neutralizar añadiendo 3ml de solución alcalina. 5. Realizar la prueba de Fehling como se indica en el experimento 1. 6. Observar y anotar los resultados.3. INVESTIGACIÓN DE POLISACARIDOS (ALMIDÓN)     FUNDAMENTO
El almidón es un polisacarido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido no a una reacción química sino a la adsorción o fijación de yodo en la superficie de la molécula de amilosa, lo cual sólo ocurre en frío. Como reactivo se usa una solución denominada lugol que contiene yodo y yoduro potasico. Como los polisacaridos no tienen poder reductor, la reacción de Fehling da negativa.     TÉCNICA 1. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de lasolución de almidón. 2. Añadir 3 gotas de la solución de lugol. 3. Observar y anotar los resultados. 4. Calentar suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color. 5. Enfriar el tubo de ensayo al grifo y observar cómo, a los 2-3 minutos, reaparece el color azul. |
RECONOCIMIENTO DE ALGUNAS BIOMOLÉCULAS:GLÚCIDOS, LÍPIDOS Y PROTEÍNAS.RECUERDATodos los seres vivos estan formados por los mismos tipos debiomoléculas: agua, sales minerales, glúcidos, lípidos, proteínasy acidos nucleicos. Algunas de ellas se conocían con el nombre deprincipios inmediatos. Los animales incorporamos la mayor partede estas biomoléculas a partir de otros seres vivos: son losnutrientes contenidos en los alimentos.OBJETIVOS1º. Reconocer químicamente los glúcidos, lípidos y proteínas.MATERIALESTubos de ensayo, gradilla, pinzas de madera para tubos, capsulas de porcelana o vidriosde reloj, pipetas, mechero Bunsen, acido clorhídrico, timol alcohólico, disolución dehidróxido sódico al 20%, solución Fehling A, solución Fehling B, solución de Lugol,reactivo Sudan III, acetona, disolución de sacarosa, de glucosa, de almidón, de albúminay aceite de oliva.PROCEDIMIENTOExperimento 1. Identificación de glúcidos reductores. Los monosacaridos y algunosdisacaridos (excepto la sacarosa) son glúcidos reductores. Esto puede ponerse demanifiesto por medio de una reacción redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato decobre (II). Repasa tus apuntes sobre glúcidos. Lassoluciones de sulfato de cobre son decolor azul. Cuando reaccionan con el glúcido reductor se forma óxido de cobre (I), decolor rojo. El cambio de coloración evidencia, por tanto, la presencia de glúcidosreductores.1. Pon en un tubo de ensayo unos 3 ml de disolución de glucosa al 1%.2. Añade con una pipeta 1 ml de Fehling A, que lleva sulfato de cobre (II).3. Añade con otra pipeta 1 ml de Fehling B, que lleva NaOH para alcalinizar el medio.4. Calienta con cuidado a la llama del mechero y observa el resultado.5. Repite el experimento utilizando una disolución de sacarosa al 1%.También puedes utilizar miel diluida en un poco de agua caliente.DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y GEOLOGÍA PRACTICAS DE BIOLOGÍAI.E.S IZPISÚA BELMONTE - HELLÍNExperimento 2. Reconocimiento de la presencia de polisacaridos: almidón. Elalmidón en contacto con reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro potasico) tomaun color azul-violeta característico. No se trata de una verdadera reacción química sinoque se forma un complejo de inclusión al quedar el almidón atrapado entre las espirasde la molécula de almidón.1. Pon en un tubo de ensaño una pequeña cantidad de engrudo de almidón.2. Añade unas gotas de reactivo de Lugol.3. Observa los resultados.4. Caliéntalo suavemente a la llama del mechero, enfríalo luego y observa lo queocurre.También puedes repetir el experimento utilizando una patata o disoluciones dediferentes glúcidos y observar lo que ocurre.Experimento 3. Reconocimiento ypropiedadesde grasas: aceite. Los lípidos son insolubles en agua pero solubles en disolventesorganicos como la acetona. Ademas tiñen de rojo con el colorante Sudan III.1. Pon 2 ml de aceite en dos tubos de ensayo.2. Añade a uno de ellos 2 ml de agua y a otro 2 ml de acetona. Agita ambos tubos. Elaceite junto con al agua formara una emulsión transitoria de pequeñas gotitas omicelas.3. Deja reposar y observa el resultado4. A continuación añade unas gotas de Sudan III y observa lo que pasa.Precaución: antes de agitar el tubo con acetona tapalo con algodón para evitarmancharte las manos.Experimento 4. Reconocimiento de proteínas: albúmina. Las proteínas producen unacoloración violeta rosacea característica con el sulfato de cobre (II) en medio basico. Esla reacción de Biuret y se debe a los enlaces peptídicos que unen los aminoacidos, loscuales en presencia de un alcali forman el llamado complejo de biuret que al reaccionarcon el sulfato cúprico da la coloración violeta.1. Pon unos 3 ml de disolución de albúmina en un tubo de ensayo.2. Añade 3 ml de solución de NaOH.3. Añade unas gotas de Licor de Fehling A (que es sulfato de cobre).4. Agita y observa el resultadoPuedes utilizar para el experimento clara de huevo diluida en un poco de agua.ANALISIS Y CONCLUSIONESAnota todo lo observado en los experimentos.Interpreta los resultados obtenidos.DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y GEOLOGÍA PRACTICAS DE BIOLOGÍAI.E.S IZPISÚA BELMONTE - HELLÍNANEXO:Los GLÚCIDOS,también llamados hidratos de carbono o azúcares, son principiosinmediatos organicos que fabrican las plantas en la fotosíntesis y que utilizan comopiezas de construcción de sus tejidos. Los incorporamos cuando comemos productosvegetales: en forma de fibra (inalterable), almidón (azúcar complejo abundante en laspastas y arroz) o como azúcares simples que contienen las frutas y el azúcar de caña o laremolacha (sacarosa, fructosa, lactosa). También los hay de origen animal(glucógeno). Alimentos energéticos por excelencia, los glúcidos son la fuente deenergía inmediata del organismo. Algunos poseen función estructural, como la celulosa(fibra) de los vegetales.Los LÍPIDOS o grasas son principios inmediatos organicos. Cuando en su moléculacontienen acidos grasos insaturados, las grasas se presentan como aceites, tal es el casode los vegetales. Si contienen acidos grasos saturados dan lugar a grasas sólidas osemisólidas, como ocurre en los animales (sebos y mantecas). Desde el punto de vistanutritivo son la mayor fuente de calorías, siendo utilizadas como reserva energética deuso no inmediato. Ademas, son portadoras de vitaminas liposolubles (A, D, E, K) ycontienen los llamados acidos grasos esenciales, de gran importancia para el buenfuncionamiento del organismo. Algunos lípidos como el colesterol, forman parteimportante de las membranas celulares.Las PROTEÍNAS son principios inmediatos organicos compuestos por aminoacidos.Las proteínas estan basicamentedestinadas a proporcionar aminoacidos con las queconstruir y reparar las estructuras propias de nuestro organismo. Las proteínas sonespecialmente abundantes en alimentos de origen animal (carne, pescado, leche,huevos). Ademas de su función eminentemente plastica o estructural también realizanotras: transportadora, enzimatica, hormonal, inmunológicaPRACTICA 5: Desnaturalizando proteínasExperimento 1Material Necesario * La clara de un huevo * Un vaso con alcohol Procedimiento * Echa la clara del huevo en el interior del vaso con el alcohol * Tapa el vaso y espera al menos media hora * A medida que pasa el tiempo observa lo que sucede en el vaso * Tapa el vaso y vuelve a observarlo al día siguiente ¿Qué ha sucedido?

   Las cadenas de proteínas que hay en la clara de huevo se encuentran enrolladas adoptando una forma esférica. Se denominan proteínas globulares. Al freír o cocer un huevo, el calor hace que las cadenas de proteína se desenrollen y se formen enlaces que unen unas cadenas con otras. Este cambio de estructura da a la clara de huevo la consistencia y color que se observa en un huevo cocinado. Este proceso que se conoce con el nombre de desnaturalización se puede producir de muy diversas maneras :
* calentando : cocer o freír
* batiendo las claras (mayonesa)
* por medio de agentes químicos como alcohol, sal, acetona, etc.
Puedes realizar un experimento similar utilizando sal de cocina en lugar de alcohol.¿Qué ha sucedido?

   Las cadenas de proteínas que hay en la clara de huevo se encuentran enrolladas adoptando una forma esférica. Se denominan proteínas globulares. Al freír o cocer un huevo, el calor hace que las cadenas de proteína se desenrollen y se formen enlaces que unen unas cadenas con otras. Este cambio de estructura da a la clara de huevo la consistencia y color que se observa en un huevo cocinado. Este proceso que se conoce con el nombre de desnaturalización se puede producir de muy diversas maneras :
* calentando : cocer o freír
* batiendo las claras (mayonesa)
* por medio de agentes químicos como alcohol, sal, acetona, etc.
Puedes realizar un experimento similar utilizando sal de cocina en lugar de alcohol.

¿Qué hay en la clara de huevo?
La clara de huevo esta formada por agua(90%) y proteínas(10%)

Composición del huevo de gallina (% en peso)
| Clara | Yema |
% | 58 | 31 |
Agua | 88,0 | 48,0 |
Proteína | 11,0 | 17,5 |
Grasa | 0,2 | 32,5 |
Resto | 0,8 | 2,0 |

¿Qué hay en la clara de huevo?
La clara de huevo esta formada por agua(90%) y proteínas(10%)

Composición del huevo de gallina (% en peso)
| Clara | Yema |
% | 58 | 31 |
Agua | 88,0 | 48,0 |
Proteína | 11,0 | 17,5 |
Grasa | 0,2 | 32,5 |
Resto | 0,8 | 2,0 |

|


Experimento 2

Material Necesario
* Dos vasos con un fondo de leche a temperatura ambiente
* Un poco de vinagre
* Medio limónProcedimiento
* Añade el vinagre a uno de los vasos
* Exprime el limón en el otro
* Agita ambos vasos para que se mezclen sus contenidos
* Espera unos minutos
* Observa lo que sucede en cada uno de los vasos
 ¿Qué es la leche? La leche es una emulsión de grasa en una solución acuosa de proteínas, lactosa, minerales y vitaminas.
 
Composición de la leche (% en peso)
 Componente |  Vaca |  Oveja |  Cabra |
 Agua |  87,0 |  82,0 |  87,0 |
 Proteína |  3,5 | 5,8 | 3,6 |
 Grasa |  3,7 | 6,7 | 4,1 |
 Lactosa |  4,9 | 4,6 | 4,6 |
 Minerales |  0,7 | 0,8 | 0,9 |

 ¿Qué es la leche? La leche es una emulsión de grasa en una solución acuosa de proteínas, lactosa, minerales y vitaminas.
 
Composición de la leche (% en peso)
 Componente |  Vaca |  Oveja |  Cabra |
 Agua |  87,0 |  82,0 |  87,0 |
 Proteína |  3,5 | 5,8 | 3,6 |
 Grasa |  3,7 | 6,7 | 4,1 |
 Lactosa |  4,9 | 4,6 | 4,6 |
 Minerales |  0,7 | 0,8 | 0,9 |

¿Qué ha sucedido?

 De forma similar a lo que ocurre con el huevo, el acido presente en el vinagre (acido acético) o en el limón (acido cítrico) es capaz de producir la desnaturalización de la proteína denominada caseína que hay en la leche.

¿Qué ha sucedido?

 De forma similar a lo que ocurre con el huevo, el acido presente en el vinagre (acido acético) o en el limón (acido cítrico) es capaz de producir la desnaturalización de la proteína denominada caseína que hay en la leche.