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1. OBJETIVOS
2. marco legislativo actual
3. INTRODUCCIÓN TEÓRICA A LA FAMILIA “Enterobacteriaceae”
4. TOMA DE MUESTRAS
5. MATERIALES NECESARIOS
6. PROCEDIMIENTO
7. RESULTADOS
8. CONCLUSIONES


1. OBJETIVOS DE LA PRATICA

• Realizar el analisis de una muestra de agua para estudiar la presencia de microorganismos: coliformes totales, Escherichia coli y Enterococos, con la finalidad de ver si es apta para el consumo humano.
• Conocer el marco legislativo actual con respecto al analisis de agua para consumo humano y agua envasada.
• Conocer en profundidad las características del grupo de microorganismos englobados dentro de los Coliformes Totales y Enterococos.

• Familiarizarse con el instrumental del laboratorio de microbiología


2. MARCO LEGISLATIVO ACTUAL

Los criterios para el analisis de la calidad de las aguas no estaban unificados a nivel europeo. Cada país aplicaba su propia normativa y metodología según los métodos oficialesestipulados por cada ministerio de sanidad o bien por las comunidades autónomas, en el caso de España. Por ello surge la necesidad de unificar todos los procedimientos y límites bacteriológicos a nivel europeo. En el año 1996 surgió la política de agua comunitaria, creandose la directiva 98/83/CEE relativa a la calidad de aguas destinadas al consumo humano. Dos años mas tarde en el año 2000 surge la directiva 2000/60/CE por la que se establece un marco comunitario de actuación en el ambito de la política de aguas. En España en el año 2002 se crea un decreto R.D. 1074/2002 en el que se designan dos métodos de analisis para el agua de consumo humano: la rampa de filtrado y la colimetría. Un año mas tarde se creó el R.D. 140/2003 en el que se establecen los criterios sanitarios de la calidad del agua de consumo humano.
Los criterios microbiológicos para aguas de consumo humano y aguas envasadas son

|Microorganismo |Agua Consumo humano |Agua envasada |
En esta clase se encuentran las siguientes subclases principales: Deshidrogenasas y oxidasas. Son más de un centenar de enzimas en cuyos sistemas actúan como donadores, alcoholes, oxácidos aldehidos, cetonas, aminoácidos, DPNH2, TPNH2, y muchos otros compuestos y, como receptores, las propias coenzimas DPN y TPN, citocromos, O2, etc.
2.Las Transferasas: Estas enzimas catalizan la transferencia de una parte de la molécula (dadora) a otra (aceptora). Su clasificación se basa en lanaturaleza química del sustrato atacado y en la del aceptor. También este grupo de enzimas actúan sobre los sustratos mas diversos, transfiriendo grupos metilo, aldehído, glucosilo, amina, sulfató, sulfúrico, etc
3.Las Hidrolasas: Esta clase de enzimas actúan normalmente sobre las grandes moléculas del protoplasma, como son la de glicógeno, las grasas y las proteínas. La acción catalítica se expresa en la escisión de los enlaces entre átomos de carbono y nitrógeno (C-Ni) o carbono oxigeno (C-O); Simultáneamente se obtiene la hidrólisis (reacción de un compuesto con el agua)de una molécula de agua. El hidrógeno y el oxidrilo resultantes de la hidrólisis se unen respectivamente a las dos moléculas obtenidas por la ruptura de los mencionados enlaces. La clasificación de estas enzimas se realiza en función del tipo de enlace químico sobre el que actúan.
A este grupo pertenecen proteínas muy conocidas: la pepsina, presente en el jugo gástrico, y la tripsina y la quimiotripsina, segregada por el páncreas. Desempeñan un papel esencial en los procesos digestivos, puesto que hidrolizan enlaces pépticos, estéricos y glucosídicos.
4.Las isomerasas: Transforman ciertas sustancias en otras isómeras, es decir, de idéntica formula empírica pero con distinto desarrollo. Son las enzimas que catalizan diversos tipos de isomerización, sea óptica, geométrica, funcional, de posición, etc. Se dividen en varias subclases.
Las racemasas y lasepimerasas actúan en la racemización de los aminoácidos y en la epimerización de los azúcares. Las primeras son en realidad pares de enzimas específicas para los dos isómeros y que producen un solo producto común.


Las isomerasas cis – trans modifican la configuración geométrica a nivel de un doble ligadura. Los óxidos – reductasas intramoleculares catalizan la interconversión de aldosas y cetosas, oxidando un grupo CHOH y reduciendo al mismo tiempo al C = O vecino, como en el caso de la triosa fosfato isomerasa, presente en el proceso de la glucólisis; en otros casos cambian de lugar dobles ligaduras, como en la (tabla) isopentenil fosfato isomerasa, indispensable en el cambio biosinético del escualeno y el colesterol. Por fin las transferasas intramoleculares (o mutasas) pueden facilitar el traspaso de grupos acilo, o fosforilo de una parte a otra de la molécula, como la lisolecitina acil mutasa que transforma la 2 – lisolecitina en 3 – lisolecitina, etc. Algunas isomerasa actúan realizando inversiones muy complejas, como transformar compuestos aldehídos en compuestos cetona, o viceversa.
Estas ultimas desarrollan una oxidorreducción dentro de la propia molécula (oxido reductasa intramoleculares)sobre la que actúan, quitando hidrógeno, a algunos grupos y reduciendo otros; actúan ampliamente sobre los aminoácidos, los hidroxácidos, hidratos de carbono y sus derivados.
5.Las Liasas: Estas enzimas escinden(raramente construyen) enlaces entre átomos de carbono, o bien entre carbono y oxigeno, carbono y nitrógeno, y carbono y azufre. Los grupos separados de las moléculas que de sustrato son casi el agua, el anhídrido carbónico, y el amoniaco. Algunas liasa actúan sobre compuestos orgánicos fosforados muy tóxicos, escindiéndolos; otros separan el carbono de numerosos sustratos.
6.Las Ligasas: Es un grupo de enzimas que permite la unión de dos moléculas, lo cual sucede simultáneamente a la degradación del ATP, que, en rigor, libera la energía necesaria para llevar a cabo la unión de las primeras. Se trata de un grupo d |Aerobios mesófilos |22º C(