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Determinacion Del Punto Isoelectrico De La Caseína - INMUNOLOGÌA, CONTENIDO CIENTIFICO, MATERIALES



PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DEL ECUANDOR SEDE ESMERALDAS
NOMBRES: TOMMY JAVIER ESPECIALIDAD: III-DE BIOANÀLISIS
APELLIDOS: BONE GARCÌA MATERIA: INMUNOLOGÌA

1._TEMA: Flebotomía y Frotis Sanguíneo
2._OBJETIVOS:
2.1._ GENERAL
Realizar el proceso de flebotomía y de frotis sanguíneo para tener conocimiento de esto en futuras practicas.
2.2._ ESPECÍFICO:
• Conocer la composición de la sangre y el concepto de plasma, suero y hematocrito
• Conocer los diferentes tipos de células sanguíneas y sus funciones
• Conocer los valores normales de estas células en un individuo sano
• Relacionar alteraciones de algunos de estos valores normales con ciertas patologías
• Aprender la técnica de extensión o frotis sanguíneo y de tinción específica de núcleos


• Manejar el microscopio utilizando aceite de inmersión
• Conocer las normas basicas relacionadas con el manejo de sangre humana y qué practicas comportan
un riesgo de transmisión de enfermedades infecciosas y cuales no.
• Toda muestra debe ser considerada potencialmente infecciosa y se deben tomar las precauciones que garanticen la seguridad del flebotomista y de los pacientes.

3._ CONTENIDO CIENTIFICO
FLEBOTOMIA:
La flebotomía, consiste también en el procedimiento de extracción de sangre desde una vena periférica. A través de sistema estéril con aguja, equipo y bolsa de colecta, semejante al procedimiento para la transfusión de sangre.
En el caso de la hemocromatosis corresponde a parte del tratamiento,ya que con esto se consigue disminuir los niveles de hierro, o reducir el exceso de eritrocitos en la policitemia.
FROTIS SANGUINEO
– El profesor realiza una leve punción a algunos alumnos de cada grupo mediante los bolígrafos de punción. Cada alumno utilizara una aguja estéril, que sera eliminada posteriormente en los contenedores especiales
habilitados al efecto.
En ningún se reutilizaran estas agujas o se manipularan fuerea del propio bolígrafo.
– Se coloca una gota de sangre en un extremo de un portaobjetos limpio, se apoya el borde de otro portaobjetos sobre esta gota, se inclina unos 45º sobre el anterior y se EMPUJA rapidamente y de un golpe hacia adelante, arrastrando la gota hacia el borde opuesto del portaobjetos.
4._ MATERIALES
Torniquetes
Torundas De Alcohol
Gradillas
Vacutainer
5._ MUESTRAS:
Sangre

6._ Procedimiento:
La muestra debe tomarse correctamente y bajo las condiciones mas favorables para evitar errores. Esto incluye la absoluta identificación del paciente, el sitio a puncionar y el volumen a colectar. El paciente debe estar en posición cómoda, de preferencia en una silla especial para venopunción con descanso para los brazos y si esta en cama, preferiblemente acostado.
EL SITIO DE PUNCION
Al proceder a seleccionar el sitio a puncionar, evite areas con hematoma, fístulas, quemaduras, escoriaciones de la piel o cicatrices.
PALPACION
Antes de proceder a puncionar, se debe escoger la vena. La mejor manera es realizando una palpación de las mismas para esa decisión. Para ello coloque el torniquete 3 a 4 pulgadaspor arriba del sitio seleccionado, para visualizarlas mejor. Debe tener presente en no mantener el torniquete por mas de 3 minutos, para evitar la hemoconcentración.
Las venas mas utilizadas para la venopunción, estan localizadas en el area antecubital. Entre éstas tenemos
Vena cubital: Es la mas larga y gruesa de todas y es la preferida por bordear la musculatura del brazo.
Para hacer la extracción de sangre. Tomamos la muestra de sangre de la siguiente forma: 
Primero coloqué el torniquete en el brazo de mi compañera, y procedí a palpar hasta que encontré una vena gruesa.

Luego desinfecté el area con una torunda de alcohol.

Después de esto tomé la aguja, le saqué su envoltura y la coloqué en los desechos comunes, luego la coloqué en el vacutainer y procedí a ingresarla en la vena, luego cuando la tenía bien ubicada, ya con mi torunda preparada en la mano, saqué el torniquete y coloqué el tubo de tapa lila en el vacutainer para proceder a extraer la sangre hasta que se llene lo suficiente.

Luego de esto saqué el tubo, y lo agité y lo coloqué en la gradilla.

7._ CONCLUSIONES
1._ La vena mas utilizada para realizar un acceso venoso por flebotomía es la mediana basílica.

8._ RECOMENDACIONES

9._PREGUNTAS:

1. TINCIONES HEMATOLOGICAS
1. INTRODUCCIÓN.
Las tinciones hematológicas son un conjunto de procesos que conducen a la coloración de las estructuras que componen las células sanguíneas. Esto tiene por objeto el aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y permite por tanto que las célulassean visual izadas microscópicamente con mayor facilidad.
2. TIPOS DE TINCIONES.
Las tinciones hematológicas pueden clasificarse según distintos criterios:
* Atendiendo al nivel de vitalidad de las células que se pretende colorear, se dividen en tinciones vitales y no vitales.
* Atendiendo al momento en el que empezaron a ser utilizadas para el diagnóstico hematológico, se dividen en tinciones tradicionales y especiales.

2. TAMAÑOS DE CELULAS BLANCAS
La forma y tamaño de las células depende de la tensión superficial, de la viscosidad del citoplasma o de la pared celular, y por supuesto de la adaptación funcional. La confluencia de todos estos factores dan lugar a un gran polimorfismo celular; unas presentan forma constante y definida, desde esferoidales a estrelladas, pasando por poliédricas; en otras su forma varía con gran rapIdez, gracias a lo cual pueden desplazarse por el medio: se dice que presentan movimiento ameboide.

El tamaño de las células es también muy variable: desde células visibles a simple vista, como el huevo de un ave, hasta células que para poder ser visualizadas requieren de grandes aumentos proporcionados por la microscopía electrónica, como es el caso de los virus, comprendidos entre 0,1 y 0,3 micras.
Teniendo en cuenta las pequeñas dimensiones en que se mueve la Citología, las unidades mas corrientemente utilizadas son: la micra (µ) equivalente a 10-6 m., y la unidad Angstrom (A), que equivale a 10-10 m.

3. TIPOS DE COLORANTES EN HEMATOLOGIA
* Colorantes acidos: tienen una especial afinidad por lasestructuras alcalinas de las células, como por ejemplo la hemoglobina. El principal de ellos es la eosina.
* Colorantes basicos: tienen una especial afinidad por las estructuras acidas de las células, como por ejemplo los acidos nucleicos. Uno de ellos es el azul de metileno.
* Colorantes neutros: son sales de un acido y de una base coloreada. Tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro. Uno de ellos es el eosinato de azul de metileno.
* Colorantes indiferentes: son los que no tienen afinidad por estructuras acidas o basicas. Son insolubles en el agua y tiñen a aquellas sustancias que tienen un poder de disolución superior al del líquido empleado para preparar la solución colorante. Uno de ellos es el Sudan III empleado para teñir las grasas.

4. FIJADORES UTILIZADOS EN HEMATOLOGIA
Fijador de Bouin-Hollander: es una variante del liquido de Bouin especialmente indicado para la fijación de los cilindros de biopsia de médula ósea cuando no es posible controlar el tiempo de fijación de la muestra en éste líquido, la conservación, puede incluso conservar las 48 horas sin que se produzca excesivo endurecimiento.
Fijador de Müller: Es la disolución acuosa de un fijador simple de dicromato potasico con la adición de sulfato sódico su importancia actual radica en que se emplea para fabricar los fijadores de Orth y de Zenker. Lo que llamamos solución madre. 
Fijador de Orth: Hoy día se emplea exclusivamente en ciertas técnicas de fijación de tejido nervios.

5. PARTES DE UN FROTIS SANGUINEO Y QUE ESTRUCTURAS SE PUEDEN VALORAN EN CADAPARTE DEL FROTIS.
1. PARTES DE UNA EXTENSIÓN.
1.1. CABEZA.
* Es la zona inicial de la extensión.
* Es la región mas gruesa.
* En ella se encuentra una mayor proporción de linfocitos, y los hematíes forman aglomerados (pilas de monedas).
1.2. CUERPO.
* Es la zona media del frotis.
* Su espesor es el apropiado.
* En ella existe una adecuada proporción entre los distintos tipos de leucocitos.
* Contiene la 'zona ideal' de observación, que corresponde a la porción que limita con la cola.
1.3. COLA.
* Es la zona final de la extensión.
* Suele tener un aspecto redondeado.
* Es la región mas fina.
* En ella se encuentra una mayor proporción de leucocitos grandes (granulocitos y monocitos), y ademas. los hematíes estan deformados y presentan una tonalidad uniforme.
* En su porción terminal suelen ser mas abundantes las plaquetas, sobre todo si son grandes.
1.4. BORDES.
* Contienen una mayor proporción de leucocitos grandes.
Si estan deshilachados, en ellos las células son difíciles de reconocer por estar deformadas o destruidas

6.
QUE TONALIDADES PRESENTAN LAS CELULAS EN UN FROTIS TEÑIDO CON WRIGHT.
La tinción de Wright es una tinción de tipo Romanowsky.
Una tinción de Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidación, así como eosina Y o eosina B.
La acción combinada de estos colorantes produce el efecto Romanowsky que da una coloración púrpura a los núcleos de losleucocitos y a los granulos neutrofílicos y da color rosado a los eritrocitos. Los componentes de este efecto sonel azul B y la eosina Y
Las propiedades de tinción de Romanowsky dependen del enlace de los colorantes a las estructuras químicas y de las interacciones del azul B y la eosina Y. Los agrupamientos de acidos nucleicos, las proteínas de los núcleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo, fijan el azul B, colorante basico.
La eosina Y, colorante acido, se fija a los agrupamientos basicos de las moléculas de hemoglobina y a las proteínas basicas.

7. COMPOSICION DE LOS REACTIVOS DE LA TINCION WRIGHT.
El colorante de Wright esta compuesto de una solución de eosinatos de azul y azures de metileno en metanol-glicerina y diluido con diluyente de 'shit' y folatos (q entran en el citoplasma de los helmintos), preparadas a base de SOSA (naOH) y a base de colorantes de acentuado poder policromatofilo.

8. ¿QUÉ SOLUCIONES PUEDEN UTILIZARSE COMO AMORTIGUADOR PARA LA TINCIÓN DE WRIGHT Y CUAL ES EL PH QUE DEBE TENER Y QUÉ SUCEDE CUANDO SE EVAPORA EL COLORANTE?

9. FACTORES DE ERROR EN UNA TINCION Y DESCRIBA EL PRINCIPIO DE LOS DISPOSITIVOS DE TINCIÓN AUTOMATIZADOS, SUS VENTAJAS Y DESVENTAJAS.

10. COMO SE OBSERVA UN FROTIS TEÑIDO EN EL MICROSCOPIO (REFERENTE AL MICROSCOPIO)EL MICROSCOPIO EXPLIQUE

 Se coloca una pequeñagota de sangre en un portaobjetos cubierto con un cubreobjetos. Enseguida se observa al microscopio abaja amplificación, pudiendo observarse un movimiento como circular de las microfilarias, y uno ondulatorio de los tripanosomas.

10._ GRAFICOS
PALPACIÓN DE LAS VENAS

DESCONTAMINACION DEL AREA

FROTIS SANGUINEO


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